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KYKY系列可控硅電泳電源

適用場合:用于金屬材料、汽車部件的陰、陽極電泳涂漆性能特點: 低紋波輸出,紋波系數≤2%,適合于電泳涂漆工藝要求; 具有計時、停機報警功能; 具有0-180秒軟啟動,避免了瞬間高壓沖擊; 具有穩壓、穩流功能(精度≤1%),并配有遠程控制箱,產品規格:輸出直流電流:20-5000A;輸出直流電壓:0-500V任選。

DNA電泳分子量標準(300-10000bp)

 DNA電泳分子量標準(300-10000BP

 數量:大量保質期:一年保存條件:4℃保存規格:50次

DNA電泳分子量標準(300-10000BP添加DMSO或者使用修飾化的堿基以及使用LATaq來擴增PCR這些在我也都做過,不過都正如你所說,都是直接擴增基因組或cDNA.

而高GC含量影響反轉錄也是肯定的,因為高GC肯定容易形成復雜的二級結構,這些可以參見《分子克隆》。我至今沒有聽說高GC含量會不利于逆轉錄,有一個證據就是在FMDV基因組RNA中有長達500bpGC tail,DNA電泳分子量標準(300-10000BP這個病毒的全基因組一樣被測序出來,但這并不能說明逆轉錄沒有遇到麻煩,人家不會告訴你經過怎樣的過程才測出來的。比如,對高GC含量的模板測序會比較困難吧,可是你到網上搜一搜,高GC含量的區域多的是,不然的話我也不無法預測我的基因5‘端有一個高GC區了是嗎?我們不能因此就推出GC含量高不影響測序吧?我自己的例子也證明了高GC含量影響逆轉錄的,因為無論是篩庫還是RACE,都是只能拿到此區域的相鄰3’區,而可以肯定的是,所得到的一定不是全長,可見肯定是由于逆轉錄不過去。在搜一下文獻,可以得出我的結論的。所以我現在最大的困難在于反轉錄,而不是PCR。

DNA電泳分子量標準(300-10000BP首先檢查一下你的基因片斷大小以及回收量(應該不是很大,所以回收的量很可能太少),太小的片斷不容易連,如果是這樣建議使用好的感受態,或增大回收的量。其次看一下你回收時所用的紫外,波長是否小于314nm,如果是建議使用314以上的,并且操作時間盡量減短。第三,建議將回收產物普通TaqA,不需回收,再連一次。最后,檢查一下感受態。還有,如果Teasy存放時間過長,建議使用新的。 

難度不出很大。DNA電泳分子量標準(300-10000BP如果誘變的位點在基因中間,你可以用一個突變引物先引入突變;然后用這個突變體做一側的引物(大引物),與另一個引物一起,以野生型基因為模板擴增。我們用這種方法做出來多個突變體。

 ZS505

ZS506LB (premixed LB,粉末可配500ml/瓶)1瓶ZOMANBIO

ZS507青霉素-鏈霉素溶液(100X)100mlZOMANBIO

ZS508-1氨芐青霉素貯存液 100mg/ml1mlZOMANBIO

ZS508-2氨芐青霉素貯存液 100mg/ml10mlZOMANBIO

ZS509羧芐青霉素貯存液 100mg/ml1mlZOMANBIO

ZS510-1硫酸卡那霉素貯存液 100mg/ml1mlZOMANBIO

ZS510-2硫酸卡那霉素貯存液 100mg/ml10mlZOMANBIO

ZS511氯霉素貯存液 34mg/ml5mlZOMANBIO

ZS512硫酸鏈霉素貯存液10mg/ml5mlZOMANBIO

ZS513鹽酸四環素貯存 50mg/ml5mlZOMANBIO

ZS514利福平貯存液 50mg/ml1mlZOMANBIO

ZS515G-418貯存液 50mg/ml1mlZOMANBIO

ZS516IPTG工作液 200mg/ml1mlZOMANBIO

ZS517X-Gal工作液 20mg/ml5mlZOMANBIO

ZS520PBS(1X)500mlZOMANBIO

ZS521PBS(10X)100mlZOMANBIO

雜交研究相關試劑

ZS601-12.5mg/ml鮭魚精DNA1mlZOMANBIO

ZS601-22.5mg/ml鮭魚精DNA10mlZOMANBIO

ZS602-15mg/ml鮭魚精DNA1mlZOMANBIO

ZS602-25mlZOMANBIO

該公司產品分類: 免疫組化試劑盒 細胞 免疫組化試劑盒 其它細胞株 大鼠細胞株 小鼠細胞株 人細胞株 免疫學試劑 細胞 生化試劑盒 生化試劑盒 PCR試劑盒 其它原代細胞 重組蛋白 細胞專用培養基 細胞專用培養基 細胞培養基 牛Elisa試劑盒 馬Elisa試劑盒 猴Elisa試劑盒

有現貨CAS:10127-02-3價格,吖啶橙價格,電泳級

CAS:10127-02-3價格,吖啶橙價格,電泳級     等全國各地現貨供應

貯存/用途:酸染色劑及移碼突變的誘變劑。吖啶橙是一種熒光色素,吖啶橙激發濾光片波長488nm。阻斷濾光片波長515nm。吖啶橙與細胞中DNA和RNA結合量存在差別,可發出不同顏色的熒光(即著色特異性),這是由于DNA是個高度聚合物,吸收熒光物質的位置較少,發綠色熒光,而RNA聚合度低,能和熒光物質結合的位置多,故發紅色熒光。

貨期:本產品有現貨

價格:歡迎來電咨詢

CAS:10127-02-3價格,吖啶橙價格,電泳級      

本公司供應各種純度的試劑,包括:優級純,分析純,化學純,試劑級,基準試劑,實驗純,教學試劑,高純試劑,色譜純,光譜純,電子純。各種包裝規格,并可提供包裝定制,歡迎來電咨詢訂購:CAS:10127-02-3價格,吖啶橙價格,電泳級

小鼠核因子-κB亞基p65親和肽說明書(NF-κB p65)Elisa檢測試劑盒價格P0395,酸性肉湯/Acid Broth,酸性罐頭食品無菌試驗,250克,RTbs-1526R,層粘連蛋白β1抗體價格,Anti-Lamininβ1,Anti-Lamininβ1646-30-0,十九酸,標準品,NonadecanoicAcid,室溫保存110885,咖啡酸,標準品,含量測定,常溫,避光,122931-48-0,砜嘧磺隆,標準品,Rimsulfuron,玉米田苗前和苗后、內吸性除草劑。小鼠ACA低價格Elisa試劑盒說明書,96T/48T,Mouseanti-centrolcentrosomeantibody,ACAELISA試劑盒,10ml,GMS12258,4%多聚甲醛固著液,50毫升Bradford protein reagent,200ml,98389-04-9,吡嘧磺隆,標準品,Pyrazosulfuron,4-甲基戊酸CAS:646-07-1,Methylvalericaci,現貨,人抗弓形體IgM抗體Elisa試劑盒價格|保質量,Human anti-toxoplasma IgM antibody,anti-tox IgM ELISA試劑盒,96T/48T,CAS:543-27-1,甲酸異丁酯,98%價格|現貨,Isobutyl chloroformat,0.98現GMS60026.2,革蘭氏陰性細菌基因組DNA純化試劑盒,20次犬維生素A VA價格Elisa試劑盒現貨,Canine Vitamin A,VA ELISA試劑盒,96T/48TGMS10250.2,載玻片細胞MAPK蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒,10/20次CAS:70458-96-7,諾沙星/呱酸/哌酸/1-乙基-6--1,4-二氫-4-氧代-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧酸/Norfloxacin,BR,99%,1克,2~8℃CAS:9001-62-1,脂肪酶(豬胰)/脂酶/脂肪水解酶/脂肪分解酵素/三酰基甘油;饷/PPL/Lipase(pocine pancreas),BR,3萬u/g,5克,2~8℃平板計數瓊脂(PCA),PlateCountAgar,250,國際標準平板計數瓊脂,含糖,用于細菌總數的測定(SN標準)豬Elisa試劑盒,豬INS Elisa試劑盒,PorcineInsulin,INSELISA試劑盒,96T/48T人PG低價格Elisa試劑盒說明書,96T/48T,HumanProteoglycan,PGELISA試劑盒編號:bs-0028R,葡萄糖合成激酶-3β抗體,Anti-GSK-3β(GlycogenSynthaseKinase-3beta)(CT),規格:0.1ml/0.2ml,96T/48T,大鼠(ON),骨粘連蛋白Elisa試劑盒,Rat osteonectin,ON ELISA試劑盒1-(Boc-氨基)環戊烷羧酸CAS:35264-09-6,1-(Boc-amino)cyclopentanecarboxylicacid,98%Q0316-9,聚乙二醇6000/聚氧乙烯6000/α-氫-ω-羥基(氧-1,2-乙二基)的聚合物/聚氧化乙烯6000/PEG6000,CP,500克,CAS:114873-00-6,BOC-L-2-苯丙氨酸,98%價格|現貨,BOC-L-2-Fluorophe ,0.98水楊酸乙酯CAS:118-61-6,Ethylsalicylat,密封保存。溶劑,有機合成,制造人造香料,99%?1-Acetyl-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridineCAS:107866-54-6,?1-Acetyl-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridine,AmberliteXAD-4非離子型大孔樹脂CAS:37380-42-0,Amberlite?XAD4,多聚芳香吸附劑用于疏水化合物,表面活性劑,藥物制造,酚,用消毒的有機物,殺蟲劑去除和恢復,粒徑0.49-0.69mmCAS:7782-63-0,亞鐵(七水,AR價格|現貨,Ferrous sulfate heptahydra,AR高品質,人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)Elisa試劑盒價格|現貨,Human tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRACP-5b ELISA試劑盒,96T/48T人纖溶酶原激活物抑制因子 PAI價格Elisa試劑盒現貨 ,Human plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA試劑盒 ,96T/48T96T/48T,uPA,大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物Elisa試劑盒Rat urokinase plasminogen activator,uPA ELISA試劑盒GMS90016,等位基因特異性表達分析試劑盒,5次人PCX價格Elisa試劑盒,96T/48T,HumanPodocalyxin,PCXELISA試劑盒3-噻吩CAS:17249-80-8,Chlorothiophene,98%

該公司產品分類: 豬Elisa試劑盒說明書 雙酚A,Bisphenol A低價 人Elisa試劑盒說明書 雞Elisa試劑盒說明書 其他試劑 大鼠Elisa試劑盒說明書 其他Elisa試劑盒說明書 其他生化產品 標準品/對照品 犬Elisa試劑盒說明書 Elisa試劑盒說明書 血清 染色液 核酸純化類 色素類 植物激素及核酸類 維生素類 碳水化合物類 緩沖劑類 氨基酸類

DYY-8C北京六一電泳儀電源 西安辦事處

聯系人:田女士 電話:18792836004 QQ1225152001

 

基本參數
并聯輸出:2組
輸出范圍(顯示分辨率):5-600V(1V) 2-200mA(1mA)  120W
外形尺寸(W×D×H):315×290×128 mm
重量:約5Kg
 
特點:
1.    *在工作狀態中,可以實時微調
2.    微電腦智能控制
3.    液晶顯示,同時顯示電壓、電流和定時時間
4.    連續可調
5.    采用開關電源輸出
6.    具有存儲記憶功能
7.    *具有過壓、過流、過載、變載、空載等多項報警保護功能
 
用途:
適用普通蛋白、核酸電泳。

 

該公司產品分類: 常用涉筆 電化學儀器 箱體

PAK6 電泳洗脫機

型號: PAK 6   適用樣品: dsDNA、ssRNA、蛋白質   尺寸(mm): W290*D135*H150   重量: 1.8公斤   取樣數量: 6孔 

K1050毛細血管電泳儀

    毛細管電泳是一類以毛細管為分離通道、以高壓直流電場為驅動力的新型液相分析技術,是分析科學中續液相色譜之后的又一重大進展,它使分析科學得以從微升水平進入納升水平,并使單細胞乃至單分子分析成為可能,使困擾我們的生物大分子如蛋白質的分離分析也因此有了新的思路。該儀器可用于對有機化合物、無機離子、中性分子、手性化合物、蛋白質和多肽、DNA和核酸片段的分析。

性能參數

高壓電源

l        輸出電壓:      35KV(可選30KV、-30KV),連續可調

l        輸出電流:      0-1000 μA

l        電壓輸出精度:  ≤0.5%

l        電流輸出精度:  ≤0.5%

l        時漂:          ≤0.05%

l        溫漂:          ≤0.05%

紫外檢測器

l        光源:          氘燈(標配),鎢燈(選配)

l        波長范圍:      190-700nm

l        波長精度:      ±2nm

l        波長重復性:    0.4nm

l        基線噪聲:      1.5×10-5Abs

l        基線漂移:      4×10-4Abs/h

l        檢 測 限:      ≤1×10-6g/ml

l        定量重復性:    RSD%≤3.0%

l        定性重復性:    RSD%≤1.3%

l        毛細管的最小長度:25cm

儀器特點

l        分離效率高,分析速度快,檢測靈敏度高

l        試劑用量少,樣品預處理簡單

l        檢測范圍寬

l        信號輸出: ±2.0V分16檔可調

l        自動調零: 滿量程自動調零

l        時間常數: 0.1/0.2/0.5/1.0/2.0/5.0/10.0s

l        可變波長選擇,190-700nm連續

l        進樣方式:電進樣 0-35KV可調, 壓差進樣 0-220mm可調

l        沖洗方式:彈簧加壓沖洗

l        液晶屏幕顯示,輕觸面板

 
該公司產品分類: 核酸分析儀 超微量分光光度計 高級液相色譜儀 色譜儀 光譜儀 K3800高效液相色譜儀 CAPEL106型毛細管電泳儀 CAPEL-105型高效毛細管電泳儀 CAPEL105M型毛細管電泳儀 CAPEL104型毛細管電泳儀 K1060型高效毛細管電泳儀 K1050型高效毛細管電泳儀 5600超微量分光光度計 5500超微量分光光度計 K2800核酸分析儀 毛細管電泳儀

50*TAE電泳緩沖液 生產廠

 
50*TAE電泳緩沖液上海依赫生物廠直銷,主要經營:化學試劑,標準,多肽產,稀土產,培養基,elisa試劑盒,抗體等現貨供應,產規格25G 100G  500G  1KG 可按客戶要求分裝,優惠促銷,質量穩定,50*TAE電泳緩沖液價格低,產價格質檢單歡迎來電或在線QQ咨詢 期待與您的合作!
上海依赫生物科技有限公司是致力于科學與生命科學域的高科技專業化創業型公司,集研發,生產,銷售體化,提純高純有機試劑,分析試劑 ,標準,多肽產,稀土產,培養基,elisa試劑盒,抗體及研發用生化試劑等等,50*TAE電泳緩沖液 廣泛用于有機合成,生物制藥,分析檢測,研發生產,自主數量達接近2萬種,上海依赫生物科技有限公司總部在上海,上海奉賢化學基地設有大型倉庫,我們本著 當天下單,當天發貨的服務原則,向遍布于大專院校,科研機構,研究院,政府機構等用戶及石油化工,制藥,食,材料。能源等企業用戶提供便捷,經濟,高效的服務流程,期待與您得合作。
“誠信”是我們立足之本,“創新”是我們生存之源,“便捷”是我們努力的方向,用戶的滿意是我們大的收益、用戶的信賴是我們大的成果  
我們的目標是建成集生產加工和銷售于體的流的化學生產銷售企業。
用途及描述:科研試劑,廣泛應用于分子生物學,藥理學等科研方面。
                                                                                            上海依赫其他優勢產推薦:細胞松弛素B/松胞菌素B/松胞素B/細胞分裂抑素B/Cytochalasin B 14930-96-2人參皂苷F2 Ginsenoside F2 62025-49-42-甲基哌啶2-Methylpiperidine 109-05-7辛硫磷 14816-18-3小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒 Mouse β-galactosidase,βGAL ELISA Kit DL-丙交酯/3,6-二甲基-1,4-二氧雜環己烷-2,5-二酮/丙交酯/內消旋乳酸/DL-Lactide 95-96-5檸檬苦素 Limonin 1180-71-85-羥基-3-(4-羥基苯基)-8,8-二甲基-4H,8H-苯并[1,2-b:3,4-b']二吡喃-4-酮Derrone 76166-59-1鹽酸伊立替康Irinotecan hydrochloride 100286-90-6新斯替寧堿Neostenine 477953-07-4大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒 Rat P-Selectin ELISA Kit 5-鳥苷三磷酸二鈉鹽/鳥苷-5'-三磷酸二鈉鹽/5'-鳥嘌呤核苷三磷酸二鈉鹽/5'-GTP,2Na 56001-37-7川續斷皂苷VI Asperosaponin Ⅵ 39524-08-8Carabrolactone ACarabrolactone A 1187925-30-9人生長調節致癌基因β/黑素瘤生長刺激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒 Human growth-regulated oncogeneβ/melanoma growth stimulating activity,GROβ/MGSA ELISA Kit兔p53(p53)ELISA試劑盒 Rabbit p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit 2-萘基硫脲/β-萘硫脲/2-Naphthylthiourea 545769枝蒿庚素Bullatine G 新木姜子素Neolitsine 2466-42-4N,N,N',N'-四甲基-O-(3,4-二氫-4-氧代-1,2,3-苯并三嗪-3-基)脲四氟硼酸鹽TDBTU N,N,N',N'-TetraMethyl-O-(3,4-dihydro-4-oxo-1,2,3-benzotriazin-3-yl) UroniuMtetrafluoroborate 125700-69-8三氯殺螨醇 115-32-2小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒 Mouse Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit N-(2-羥乙基)哌嗪-N-乙磺酸鈉鹽/N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)鈉鹽/HEPES sodium salt 75277-39-3 芹糖異甘草苷Isoliquiritin apioside 120926-46-7人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒 Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit氟氯氫菊脂(去異丙基莠去津)ATRAZINE-DESISOPROPYL 1007-28-9O-beta-D-吡喃葡萄糖苷對乙烯基苯酯p-Vinylphenyl O-beta-D-glucopyranoside 62470-46-6大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 Rat heat shock protein 60,hSP-60 ELISA Kit丙酮酸鈣/焦葡萄酸鈣/2-氧代丙酸鈣鹽/Calcium Pyruvate 52009-14-0

API Sciex 100荷蘭Princetechnologies毛細管電泳--德國赫爾納

 荷蘭Princetechnologies毛細管電泳--德國赫爾納

 

爾納貿易(大連)有限公司,2013年創建,德國公司,專業德國代購,價格有優勢

 

赫爾納德國總部Heilna Trade GmbH,2013年德國注冊(德國自有房產):

(1)德國公司:德國員工德國辦公,向全歐洲廠家直接詢價、代購。

(2)隨母公司大連力迪流體的大貨,每周從德國法蘭克?者\大連。

(3)能保證:貨源可靠、原裝進口、價格低、貨期短、有售后質保、技術支持。

(4)公司注冊號:HRB 46967。稅號:DE289560668。登記法院:奧芬巴赫市。

 

母公司大連力迪流體控制技術有限公司,1996年創建:

(1)7個歐洲高端閥門品牌:中國總代理,國內進口電磁閥專業代理商。

(2)國內進口木材干燥控制儀專業代理商。

(3) 21年歷史,中國8個實體辦事處(自有房產)、80名員工。赫爾納歐洲工業品O2O跨境電商平臺的線下支持。

 

Princetechnologies毛細管電泳德國總部采購,原裝進口,保證貨期。

 

 

公司簡介

Prince Technologies是毛細管電泳和自動進樣器設備的創新和制造專家之一。

 

二十多年來,我們為各種應用和市場開發了靈活的CE和自動進樣器系統,我們的模塊化和出色的售后支持得到了認可。

 

我們還可以在OEM基礎上提供我們產品組合中的各個組件,并將其納入您自己的項目中。

 

Prince Technologie銷售產品的方法與技術本身一樣靈活和開放,我們希望與您合作,擴大我們的市場,創造新的機會。我們在許可我們的技術方面取得了很大的成功,我們相信您會對它們的各種用途印象深刻。 OEM方法明顯有利于雙方合作伙伴,而NEN-EN-ISO 13485:2016認證公司的小規模確保了短溝通渠道,效率,質量和對每個客戶的奉獻精神。

 

我們的模塊化和集成的先進分析技術系列為各行各業提供靈活,高性能的專用解決方案,直接交付,通過分銷商和OEM許可證持有者。

 

 

主要產品及關鍵詞:

Princetechnologies電泳儀

Princetechnologies毛細管電泳

Princetechnologies自動進樣器

Princetechnologies探測器

Princetechnologies配件

Princetechnologies耗材

PrincetechnologiesCE系統

Princetechnologies網址

Princetechnologies性能

Princetechnologies廠家

Princetechnologies價格

Princetechnologies經銷

 

 型號:

CE800series

CE700series

LTQ

LTQ-XL

LTQ VELOS  

API Sciex 100API Sciex 365Q-Star-Pulsar

Esquire LCEsquire 3000 plus FTMS

 

如需進一步了解Princetechnologies毛細管電泳請與我們聯系

 

產品均為歐洲原裝進口,提供報關單,發票(發貨同時提供),個別具體客戶有需要,可提供原產地證明(須+手續費,歐洲廠家付給當地商會,手續較麻煩,會延誤1周貨期)

 

赫爾友道,融中納德 --- 我們杜絕假貨,我們價格低廉,我們品質保證

誠信公告:Heilna不是該產品的代理商,只是一個貿易商。我們親自把德國產品以優廉價格口到中國!此公告旨在維護中國工業品市場的良好交易環境。

注塑玻璃板支架 電泳槽玻璃片干燥架 玻璃板干燥架 訂貨號:KY3711注塑玻璃板支架 ,電泳槽玻璃片干燥架, 玻璃板干燥架

注塑玻璃板支架  電泳槽玻璃片干燥架  玻璃板干燥架      訂貨號:KY3711

產品簡介:架體采用注塑成型,方便清洗;www.bjkaiyun.com清洗后的垂直電泳槽的玻璃片可豎置在干燥架的夾內保存和晾干;點狀設計架與玻璃片接觸位置,保持清洗后的玻璃片的潔凈。

產品規格:外形尺寸(L×W×H):230×110×84mm; 

北京現貨 超低分子量蛋白電泳試劑盒,超低分子量蛋白電泳試劑盒 價格

 北京現貨 超低分子量蛋白電泳試劑盒,超低分子量蛋白電泳試劑盒 價格

 

     產品組成:

組分貨號

組分

名稱

規格

貯存

RTD6121

組分1

18%多肽電泳分離膠預混液

50ml

4

RTD6122

組分2

5%多肽電泳濃縮膠預混液

20ml

4

AA0486

組分3

10% APS(干粉)

0.5g

室溫

TE040

組分4

TEMED

1ml

室溫

AB080

組分5

10×陽極緩沖液(下槽緩沖液)

250ml

4

CB010

組分6

10×陰極緩沖液(上槽緩沖液)

200ml(干粉)

4

TP050

組分7

2×Tricine 上樣緩沖液(含還原劑)

1ml

-20

RTD6201

組分8

考馬斯亮藍快速染色液

500ml

4

● 產品簡介:

本試劑盒含有超低分子量蛋白電泳(多肽電泳)全套試劑,可以用來檢測1-20kd的多肽大小。本試劑盒可配制至少10塊常規大小的PAGE膠。

● 使用說明:

10% APS配制:

10% APS配制-5 ml0.5 g APS干粉溶于5 ml滅菌水中,徹底溶解后分裝,1 ml/支,-20備存,每次取一管使用。10% APS應盡量減少室溫存放時間,以防失效。10%APS4有效期為一周,-20有效期6個月。若發現凝膠聚合時間延長,應考慮更換使用-20度保存的10%APS

制膠:

配制分離膠

1.按照表一將不同體積的成分加入到小燒杯或離心管混合;立即混勻5-10秒,以使溶液充分混勻。

2.在凝膠模具中迅速灌入適量分離膠溶液,然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-3 cm的水層,使凝膠表面保持平整。

3.靜置30-60分鐘,待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面表示凝膠已聚合。

表一  (一塊0.75mm mini膠用量)*

 

分離膠

濃縮膠

 

18T, 5%C /5.0 ml

5T, 3.3%C/2 ml

18%多肽電泳分離膠預混液

5 ml

/

5%多肽電泳濃縮膠預混液

/

2 ml

10APS

45-60 μl**

20-30 μl

TEMED

5 μl

2 μl

注:凝膠的聚合時間與環境溫度有關。夏天溫度較高時,聚合較快;冬天氣溫低時,聚合時間會延長?梢愿鶕h境溫度的不同調節APS的加入量。

**  如非必須,不要使用厚度1.0mm1.5mm的凝膠,盡量使用厚度0.75mm的凝膠,這樣會減少電泳后染色和脫色的時間。

II 配制濃縮膠

去除覆蓋在分離膠上的水層,用濾紙將殘留的水吸去。

1.按照表一將不同成分加入到小燒杯或離心管中混合;立即混勻5-10秒,以使溶液充分混勻。

2.將梳子插入凝膠內,避免產生氣泡。

3.靜置30-60分鐘待凝膠聚合

電泳:

電泳前,將10×陽極緩沖液(AB080)稀釋成1×陽極緩沖液備用;按照標簽說明配制10×陰極緩沖液,用蒸餾水稀釋成1×陰極緩沖液備用。將電泳槽的外槽加入1×陽極緩沖液,內槽加入1×陰極緩沖液,輕柔拔出梳子,將Marker或蛋白樣品(已經過2×Tricine上樣緩沖液[TP050]處理)加入點樣孔,80-120V電泳30-60分鐘左右,待指示前沿到達分離膠上沿時,把電壓調至150-200V,至藍色指示前沿至分離膠3/4位置時即可停止電泳。整個電泳過程大約需要3-4個小時。注:如果電泳時間過短,染色時,指示前沿容易遮擋小于5kd的小肽。

染色(使用組分8-考馬斯亮藍快速染色液):

用前必讀:

考馬斯亮藍快速染色液不同于實驗室常用的考馬斯亮藍G-250染色液(0.025% G-25010%冰醋酸,快速染色液不僅具有染色多肽功能外,還具有固定小肽的作用,使得小肽不容易在染色和脫色中從PAGE中漂離。常規的G-250染色液在染色中,低于5KD的小肽容易從膠中漂離。

使用前如發現瓶中有少許沉淀,請混勻后使用。

以下“使用方法”是針對0.75mm厚度,10×10cm凝膠染色程序。

1. 漂洗:

將電泳后的PAGE膠取下放入微波爐專用塑料容器中,加入適量超純水(以剛剛覆蓋過膠面為適),微波爐中高火(700-800瓦)加熱,至溶液沸騰后繼續煮沸1-2分鐘;取出容器均勻搖動數下;重復上述步驟2-3次;棄盡水溶液。

2. 染色:

加入適量染色液(用量根據凝膠面積的大小及容器大小而定,以浸沒膠面為準),放入微波爐中高火(700-800瓦)加熱,溶液沸騰后繼續煮沸1-2分鐘;取出容器均勻搖動數下;重復上述步驟數次,直至蛋白條帶清晰可見時即可停止加熱;棄去染色液(收集到備用容器中,可以反復利用1-2次)。

注:此步驟是染色的關鍵步驟,染色停止的標準是條帶清晰可見。如由于揮發導致染色液減少,可適當補加染色液。

如使用1.0mm或更厚的凝膠,染色煮沸時間會相應延長。

3. 脫色:

加入適量超純水(以剛剛覆蓋過膠面為適),放入微波爐中高火(700-800瓦)加熱,至溶液沸騰后繼續煮沸1-2分鐘;取出容器均勻搖動數下;重復上述步驟1-2次,此時PAGE膠的藍色背景應已去除。

4. 保存:

棄去水溶液,加入適量超純水,觀察和保存染色結果。

 染色液使用注意事項:

1 使用方法中的各種參數僅針對面積8×10cm10×10cm,厚度0.75mm的凝膠,如果使用更大面積或更厚的凝膠,請加入更多的染色液并延長各步驟的時間。

2 對于SDS-PAGE膠,步驟1的漂洗非常重要,因為殘余的SDS會嚴重影響后續的染色。

3 本染色液可以重復利用1-2次,敏感性沒有明顯下降。

4 本染色液有輕微腐蝕性,請帶手套操作。使用后,請蓋好瓶蓋,4℃密封保存。

 

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