計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
名稱:小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定elisa試劑盒價格產(chǎn)地:國產(chǎn)|進口品牌:百奧萊博英文名:Mouse Monoclonal Ig subclass Elisa Identification Kit編號:L0101儲存溫度:-20℃規(guī)格:96T×2本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類(可區(qū)分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA)。采用小鼠抗體共有位點的二抗包被微孔板,與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合,再加入HRP標記的抗小鼠各類、亞類的抗體來分別反應(yīng),最后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止,再通過酶標儀檢測吸光度來判斷被測單克隆抗體的類或亞類。本試劑盒具有極高的分辨率,是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類的可靠工具。具有高靈敏度、高特異性、結(jié)果容易判定的特點。主要用于培養(yǎng)上清中小鼠單克隆抗體Ig類、亞類的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。 試劑盒組份:酶標板(含自封袋2個)-——————96孔×2 標本稀釋液———————————15ml 酶標二抗(6種)-—————————6×4ml 通用陽性對照——————————1ml 通用陰性對照——————————1ml 顯色劑A-————————————15ml 顯色劑B-————————————15ml 反應(yīng)終止液———————————15ml 20×清洗液———————————50mL 加樣圖—————————————2份封板膜—————————————4張說明書—————————————1份 使用方法: 1、首先將試劑盒恢復(fù)室溫(大約30分),然后用純水把清洗液配成工作濃度(一份濃縮清洗液加19份純水)。 2、取出酶標板。每個標本需要6孔,陽性對照6孔,陰性對照6孔。多余的用自封袋保存,記得放入干燥劑。 3、將標本檢測孔每孔先加入標本稀釋液各50μl。然后將50μl細胞培養(yǎng)上清(或特異親和純化的抗體)再加入酶標微孔板,每個標本加6孔;陽性對照和陰性對照孔不加標本稀釋液也是各加6孔每孔100μl。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。 4、棄去板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。再在每個標本的6孔中分別加入6種酶標二抗各100μl,通用陽性、陰性對照的各孔也一樣。在加樣圖上或酶標板上做好標記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。 5、吸棄板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl,換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。 6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果,看顯色藍的那個孔所對應(yīng)的酶標二抗就知道此標本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液(每孔50μl)終止反應(yīng)后用酶標儀450nm測定波長,630nm參考波長雙波長測定結(jié)果,參看高值孔所對應(yīng)的酶標二抗就知道此標本的Ig類或亞類(陽性對照OD一般不小于0.8,陰性對照一般不高于0.15,陽性判定標準:樣品OD大于陰性O(shè)D+0.15,陰性O(shè)D低于0.05按0.05算)。 注意事項: 1、雖然本試劑盒過期后很久還有使用價值但還是請您在有效期內(nèi)使用。 2、在檢測腹水類單抗時要稀釋到1/5萬,雖然可以分辨但并不建議您這樣做。此類樣品成分十分復(fù)雜,有干擾結(jié)果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的F030215抗體鑒定試劑。它會給您帶來滿意的結(jié)果,同時您也可以使用抗原包被板來解決此類問題。 3、手洗板子時一定要把孔加滿,停留10秒然后棄盡,最后要拍干凈。特別是在酶標二抗溫育后洗板時一定要把酶吸出而不是甩出,要吸凈。這個在手工洗板時對結(jié)果很重要。 4、一次沒用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好,隨盒存放。 5、拿放板子時不要劇烈抖動,以免孔間交叉污染出現(xiàn)錯誤結(jié)果。 6、本試劑一般不會出現(xiàn)兩個陽性,但出現(xiàn)兩個陽性的現(xiàn)象不論在進口或國產(chǎn)試劑中都是真實存在的,一般會一個OD很高,另一個很低但卻還能判為陽性,實驗分析表明這種情況下以O(shè)D高值孔為準,出現(xiàn)這種情況有多重原因:1、培養(yǎng)的細胞中有“飼養(yǎng)細胞”殘留,2、抗體本身存在變異, 3、樣品為非特異親和純化的抗體或樣品是腹水,4、上清出現(xiàn)少量污染,5、實驗操作粗放,6、加錯試劑。 7、通用陽性對照數(shù)據(jù)并不一定完全一樣,僅作為試劑有效指示。 特別提示:不具備ELISA基礎(chǔ)知識和操作的人員不要完成此實驗或類似實驗,因為這可能會給您帶來錯誤的結(jié)果和不必要的損失!實驗中有疑問請聯(lián)系我們謝謝! 儲存條件:不開啟2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過于頻繁開啟使用有可能因此使效期縮短。我公司的小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒價格,性價比高,貨期短,送貨上門,歡迎您來電咨詢購買,另外,我公司還生產(chǎn)供應(yīng)銷售下列產(chǎn)品:PY01-027 1-萘乙酸 AR|BR 25克 ARB11334 人胎盤生長因子(PLGF)酶聯(lián)免疫定量檢測 Human placenta growth factor,plgf ELISA KITARB13705 兔金屬蛋白酶組織抑制因子-3(TIMP-3)含量檢測 Rabbit tissue inhibitor of metalloproteinases-3 ,timp-3ELISA KIT堿性品紅 MES 632-99-5BTN131129 植物種屬鑒定PCR Mix Plant DNA Barcoding PCR Mix5-氨基水楊酸 SAHH 89-57-6三磷酸脫氧核糖核苷酸 Z-L-AlanineARB10193 人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)代做ELISA實驗 Human α-glutathione s-transferases,α-gst ELISA KITARB13056 小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)Elisa方法檢測 Mouse transferrin receptor,tfr ELISA KITTris-HCl緩沖液(1mol/L,pH7.0-9.0,RNase free) 500ml乙酰丁香酮 Cytidine 2478-38-8PY02-069 抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅶ號 250克 間甲苯甲酸 Trifluorothymidine 99-04-7ARB12927 小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)尿液中含量檢測 Mouse cystatin c,cys-c ELISA KITF030406 膠體金標記山羊抗小鼠IgG2a抗體 Goat Anti-Mouse IgG2a*GOLDARB10638 人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)elisa檢測操作說明書 Human anti-endostatin antibody,es-ab ELISA KIT79-06-1 丙烯酰胺 Acrylamide小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒價格關(guān)鍵詞:L0101,小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒,免疫分析試劑盒,品牌:百奧萊博
·膠體金標記山羊抗豬IgG抗體編號:F030436 英文名稱:Polyclonal Goat Anti-Pig IgG*GOLD 規(guī)格:1ml/10ml·兔抗雞IgY IgG抗體編號:F020212 英文名稱:Rabbit Anti-Chicken IgY 規(guī)格:1mg/100mg 本制品免疫抗原來自健康雞蛋黃和血清中的IgG(IgY),經(jīng)多次免疫健康雄性白兔而得來。 緩沖液成分:0.01MPBS、PH:7.2、5/萬NaN3. 純化方法:雞IgG(IgY)親和純化。交叉反應(yīng):本抗體可以和雞其它Ig有一定交叉反應(yīng),實際應(yīng)用良好。產(chǎn)品純度:以和雞IgG(IgY)反應(yīng)的抗體計不低于總蛋白的99%。儲存方法:請避光存放在-20℃。注意事項:雖然本產(chǎn)品很穩(wěn)定但您還是避免過于反復(fù)融化。如果每次使用很少量那您可以將本試劑適度分裝,每次使用一管;蚨唐诖娣庞4度。標記金子建議用PB透析后標記。有效期限:請您在管體注明有效期內(nèi)使用。·人IgG(凍干粉)編號:CYB161001 英文名稱:Rabbit Anti-Chicken IgY 規(guī)格:10mg|50mg|100mg|1000mg 免疫球蛋白(Igs)被廣泛應(yīng)用于免疫學及分子生物學中各個分支學科的研究領(lǐng)域,它即可作為大分子球蛋白用于生物化學的研究,也可以作為抗原用于免疫學和臨床醫(yī)學之中,以下產(chǎn)品采用分段飽和硫酸銨鹽析與弱堿性陰離子交換層析的方法,純化各種人與動物血清(IgG 冷凍干燥及液體制成)。每種產(chǎn)品可達到免疫電泳,聚丙烯酰胺凝膠電泳純!局饕阅堋考兌龋篠DS-PAGE,90﹪以上;抗原性,免疫電泳法90﹪以上;溶劑為0.01mol/L pH7.2PBS。穩(wěn)定性:液體-20℃(2 年);保存:干粉4℃(3 年以上)【應(yīng)用范圍】1、可作參考蛋白,分子量15.5 萬;2、參考抗原,如藥物試驗中觀察免疫效果,用IgG 作參考抗原;3、作抗原使用:(1)免疫動物;(2)測定對應(yīng)抗體;(3)吸收雜抗體的抗原,當制成抗IgA、抗IgM,如果與IgG 有交叉反應(yīng)時,用IgG 作抗原吸收去雜抗體!咀ⅰ坑0.01mol/Lph7.4PBS 溶解時,如有溶解不完全現(xiàn)象時,可加入0.1N NaOH 幾滴助溶即可。小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒價格關(guān)鍵詞:L0101,小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒,免疫分析試劑盒,品牌:百奧萊博
ARB12416 大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa測定使用說明書 Rat intercellular adhesion molecule 1,icam-1 ELISA KITBL0908 FITC標記兔抗狗IgG抗體BTN131207 小牛胸腺DNA溶液 Calf Thymus DNA SolutionARB10161 人SmAd7 免費代測 Human mothers against decapentaplegic homolog 7,smad7 ELISA KITARB10519 人白細胞介素6(IL-6)檢測服務(wù) Human interleukin 6,IL-6 ELISA KIT1-萘酚酞-甲酚紅指示劑 100mlJ0202 兔抗雞卵清蛋白抗血清 鈣檢測試劑盒(甲基麝香草酚藍微板法) 100TARB11115 人乳腺癌標志物-CA153代做ELISA實驗 Human mammary carcinoma marker-ca153 ELISA KITBL1423 SYBR Green Ⅱ(10000×)硫酸慶大霉素溶液(50mg/ml) Gentamycin Sulfate 50mg/ml 10mlARB13784 豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA代測服務(wù) Guinea pig leukotriene b4,lt-b4 ELISA KITF030301 膠體金標記小鼠抗乙肝核心抗原抗體 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*GOLD
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大鼠纖連蛋白(FN)elisa試劑盒說明書代測、價格、廠家、說明書、用途等相關(guān)信息資料的說明,我們將為您免費提供。我司生產(chǎn)經(jīng)營各種高質(zhì)量國產(chǎn)ELISA試劑盒,現(xiàn)貨供應(yīng)、種類齊全、質(zhì)量可靠、價格優(yōu)惠。為您的實驗提供優(yōu)質(zhì)的實驗用品,是南京森貝伽公司的服務(wù)宗旨,如有需求,歡迎您來電咨詢大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒說明書!大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒說明書產(chǎn)品資料
英文名稱:Rat Fibronectin,FN ELISA Kit
產(chǎn)品貨號:SBJ-R0766
品牌:森貝伽
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
保存:2-8℃,避光保存
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨供應(yīng)
有效期:六個月
注:僅用于科研,不得用于臨床診斷
大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒說明書儲存方式
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒說明書注意事項
1.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
2.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。3.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。5.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。7.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
8.按照試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
9.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
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人原鈣黏素1,PCDH1ELISA試劑盒使用說明書elisa法測定規(guī)格:48T/96T人原鈣黏素1,PCDH1ELISA試劑盒本試劑盒僅供體外研究使用!ELISA法定量測定人尿液或其它相關(guān)生物液體指標的含量。ELISA試劑盒操作注意事項 1. 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。 3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。 5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6. 洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。 8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。標本的采集及保存 1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000 g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 注:標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。 標本的稀釋原則: 首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準確的。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細的記錄。最后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應(yīng)再乘以“N”。 標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為50 U/L,做系列倍比稀釋后,分別稀釋50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,1.56 U/L,0.78 U/L,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 U/L,臨用前15分鐘內(nèi)配制。 如配制25 U/L標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)50 U/L的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendor人原鈣黏素1,PCDH1ELISA試劑盒公司其他相關(guān)產(chǎn)品信息:人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒人B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒 人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒 人巨噬細胞集落刺激因子受體(M-CSFR)ELISA試劑盒人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒 人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒 人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒 人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒 人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒
關(guān)鍵詞:人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)elisa試劑盒報價
試劑盒名稱:人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒
英文名稱:Human Varicella zoster virus IgG,VZV-IgG ELISA Kit
試劑盒價格:聯(lián)系哈靈QQ客服或來電詢價!
試劑盒產(chǎn)地:進口/國產(chǎn)
儲存方式:2-8℃
售后服務(wù):技術(shù)老師全程提供ELISA實驗指導(dǎo)以及免費代做實驗。
人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒報價哪里有賣(買)?價格怎么樣?能否提供免費代測服務(wù)?
回答:上海哈靈生物ELISA試劑盒研究所 批發(fā)各種試劑,標準品,抗體,elisa試劑盒,實驗室常規(guī)儀器,價格優(yōu)惠, 貨源充足,并且提供免費代測服務(wù)!如您有購買的意向或任何產(chǎn)品上的疑問,歡迎您的來電咨詢,聯(lián)系QQ客服或在我們的網(wǎng)站留言!
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人免疫抑制酸性蛋白(IAP)ELISA Kit | 96T/48T |
人帕金森氏病2Parkin(Park2)ELISA Kit | 96T/48T |
人乳頭瘤病毒(HPV)ELISA Kit | 96T/48T |
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA KIT | 96T/48T |
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1、靈敏度高,數(shù)據(jù)準確,操作簡單
2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4、適用血液,尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,等多種標本
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F2304-B | 人ANG-1elisa試劑盒 |
F2305-A | 人血管生長素(ANG)elisa試劑盒 |
F2305-B | 人ANGelisa試劑盒 |
F2306-A | 人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa試劑盒 |
F2306-B | 人KAF/ARelisa試劑盒 |
F2307-A | 人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa試劑盒 |
規(guī) 格 (48T/96T)
樣品類型 血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等樣品類型
檢測方法 酶聯(lián)免疫法
特 異 性 公司elisa試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性
交叉反應(yīng) 由于當前的酶聯(lián)免疫科學技術(shù)和知識有限,現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此,交叉反應(yīng)可能仍然存在
樣 本 量 50-100 μL
實驗時間 1–4.5h
儲存條件 2-8°C
儲存方法 可以存儲在2 - 8°C長達1個月(專家建議:4°C恒溫保存,酶免試劑盒實驗效果更佳)。對于長期存儲,請在-20°C的存儲。盡量保持試驗板在密封鋁箔袋,避免潮濕
有 效 期 6 months
工作原理人血管生成素1ELISA試劑盒的原理 ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。
產(chǎn)品選型人血管生成素1ELISA試劑盒的類型 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型:
雙抗體夾心法測抗原
操作流程雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下:1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2) 加受檢標本,保溫反應(yīng)。標本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。3) 加酶標抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關(guān)。4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標用的抗體最好分別取自不同種屬的動物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測。 在一步法測定中,當標本中受檢抗原的含量很高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,此時反應(yīng)后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標準曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同(參見1.3.2,圖1-4),如按常法測讀,所得結(jié)果將低于實際的含量,這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)(hook effect),因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴重時,反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時,應(yīng)注意可測范圍的最高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。 假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇,也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測中應(yīng)注意亞型問題,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性,這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問題! ‰p抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風濕因子(RF)的干擾。RF是一種自身抗體,多為IgM型,能和多種動物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標本中如含有RF,它可充當抗原成份,同時與固相抗體和酶標抗體結(jié)合,表現(xiàn)出假陽性反應(yīng)。采用F(ab')或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,由于去除了Fc段,從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,已被列為這類試劑的一項考核指標! ‰p抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。
安裝要求人血管生成素1ELISA試劑盒樣品要求
·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原。
·檢測的樣本為細胞培養(yǎng)上清、人和動物的血清、血漿。
·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存,若長期保存應(yīng)-70℃。
·樣本量的要求:若一個指標做復(fù)孔檢測應(yīng)不少于250ul,做單孔檢測應(yīng)不少于120ul。建 議若客戶樣本量充足最好提供500ul以上。
·客戶的樣本收集后,立即按要求保存,切忌反復(fù)凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運輸。郵寄前請與技術(shù)支持溝通確認。
小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒CL0150 現(xiàn)貨供應(yīng),廠家直銷付款方式:可以通過銀行轉(zhuǎn)帳,支付寶
上海一基實業(yè)有限公司主營國產(chǎn)、進口(免費代測樣品)ELISA試劑盒,低溫恒溫槽,制冰機,折光儀,對照品,標準品,生化試劑,細胞,血清,抗體,生物試劑,培養(yǎng)基等產(chǎn)品。小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒CL0150 免費快遞送貨上門。!
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CL0126 小鼠IgA /Mouse IgA 1mg CL0127 "小鼠IgM /Mouse IgM " 1mg CL0128 小鼠IgG3 Mouse IgM 1mg CL0129 小鼠IgG2b Mouse IgG2b 1mg CL0130 小鼠IgG2a Mouse IgG1 1mg CL0131 小鼠IgG1 Mouse IgG 1mg CL0132 小鼠IgG Mouse IgG 1mg 10mg CL0133 豬IgG Pig IgG 1mg 10mgCL0134 山羊IgG Goat IgG 1mg 10mgCL0135 人IgM Human IgM 1mg 10mgCL0136 人IgG Human IgG 1mg 10mgCL0137 兔IgG Rabbit IgG 1mg 10mgCL0138 猴IgG Monkey IgG 1mg 10mgCL0139 雞IgYChicken IgY 1mg 10mgCL0140 狗IgG Dog IgG 1mg 10mg CL0141 鴨IgY Duck IgY 1mg 10mg CL0142 馬IgG Horse IgG 1mg 10mg CL0143 大鼠IgG Rat IgG 1mg 10mg CL0144 豚鼠IgG Guinea pig IgG 1mg 10mg CL0145 貓IgG 1mg 10mg CL0146 牛IgG Bovine IgG 1mg 10mg CL0147 綿羊IgG Sheep IgG 1mg 10mg CL0148 乙肝表面抗原 HBSAg 1mg 10mg CL0149 辣根酶標記鹽酸克倫特羅 HRP* Clenbuterol 0.1ml 1ml
小鼠單克隆抗體Ig類/亞類鑒定ELISA試劑盒CL0150
人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 參數(shù):
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F3421-A | 人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 | Human fetal hemoglobin,HBF elisa Kit | 48T |
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F3421-A | 人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 | Human fetal hemoglobin,HBF elisa Kit | 48T |
人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 廣泛應(yīng)用在免疫學檢驗的各領(lǐng)域中,我們來介紹一下更簡便的操作說明,編號:F3421-A,英文名稱Human fetal hemoglobin,HBF elisa Kit
1、人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 操作方法一用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 (2).加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 (3).加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 (4).加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 (5).終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
2、人胎兒血紅蛋白(HBF)elisa試劑盒 操作方法二:用于檢測未知抗體的間接法: (1).用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 (2).加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)(3).于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 (4).于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘 (5).于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點,已廣泛應(yīng)用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領(lǐng)域。
3、臨床標本的收集和保存 用于ELISA測定的臨床標本最為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4~6點之間,會有一峰值出現(xiàn):生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放,因此,在測定此類激素時,有必要在密切相連的時間間隔內(nèi)采取數(shù)份血樣本,以其中間值為測定值。又如當從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r,血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高。再如治療藥物的檢測,應(yīng)根據(jù)藥代動力學選擇服藥后的最適時間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物和特種蛋白等的檢測的血清標本的收集則沒有時間和體位方面的影響,只是在處理和保存方面要考慮。
(1)要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。(3)血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70℃以下。(4)冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標本的混勻亦應(yīng)注意,不要進行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。(5)標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
4、試劑準備 在臨床實驗室,對試劑準備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現(xiàn)假陰性。因此在ELISA測定中試劑的準備最為關(guān)鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。此外,當試劑盒以O(shè)PD為底物時,則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時配制。
在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是唯一的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。
四、溫育溫育是ELISA測定中影響測定成敗最為關(guān)鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。最為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。溫育這一步是臨床ELISA測定中最容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應(yīng)溫育時間為37℃ 30分鐘~1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1~2小時才能有較完全的結(jié)合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關(guān)于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時間。一般來說,加完樣本和/或反應(yīng)試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中,測定由衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應(yīng)的1 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達到37℃,從而適當延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應(yīng)溶液中測量觀察即可。